試驗設計 實(shí)驗樣品:自制益生菌沖劑,主要原料為復合乳酸菌粉(嗜酸乳桿菌+乳雙歧桿菌+低聚木糖,具體比例:嗜酸乳桿菌23%、乳雙歧桿菌2%,其余為稀釋劑)和低聚木糖,1.5g/袋的鋁箔袋裝,推薦食用方法為每天1次,每次1袋,溫開(kāi)水沖飲。 實(shí)驗動(dòng)物:選用SPF級昆明種雌性小白鼠48只,6~8周齡(體重為18~22 g)。 劑量與分組:實(shí)驗按人體每日推薦量(以?xún)和w重30 kg計,推薦量為0.05 g/kg·BW)的5倍(0.25 g/kg·BW)、10倍(0.5 g/kg·BW)和30倍(1.5 g/kg·BW)分成對照組和低、中、高劑量組。 灌胃方法及試驗測定指標:實(shí)驗時(shí)分別稱(chēng)取樣品0.50、1.00、3.00 g,用純凈水配制成20 mL的樣液,分別供低、中、高三個(gè)劑量組動(dòng)物灌胃使用,將小鼠在實(shí)驗室條件下適應三天后,隨機將48只鼠分為四組,每組12只,每日灌胃給予受試物,給樣量根據每周體重增減調整,連續灌胃四周,對照組灌服無(wú)菌純凈水。在實(shí)驗結束前的第4天免疫動(dòng)物進(jìn)行小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應試驗(足跖厚度增加法)、ConA誘導的小鼠脾淋巴細胞轉化試驗(MTT法)和NK細胞活性測定(LDH法)。
試驗結果 (1)益生菌沖劑對小鼠體重的影響 由表1和表2可知,各劑量組各期體重與對照組相應時(shí)期體重比較,差異均無(wú)顯著(zhù)性意義,表明益生菌沖劑對小鼠的體重生長(cháng)無(wú)明顯影響。
(2)益生菌沖劑對小鼠脾臟重量和胸腺重量的影響 由表3可知,各劑量組臟器/體重比值與對照組比較,差異均無(wú)顯著(zhù)性意義,表明益生菌沖劑對小鼠的脾臟重量和胸腺重量無(wú)明顯影響。
(3)益生菌沖劑對小鼠免疫力的影響 益生菌沖劑對小鼠的遲發(fā)型變態(tài)反應的影響:由表4可知,綿羊紅細胞誘導的小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應試驗(足跖增厚法),其高劑量組足跖增厚值與對照組比較,差異有顯著(zhù)性意義。
益生菌沖劑對ConA誘導的小鼠脾淋巴細胞轉化反應的影響:由表5可知,對ConA誘導的小鼠脾淋巴細胞轉化反應,其高劑量組光密度差值高于對照組,差異有顯著(zhù)性意義,益生菌沖劑的脾淋巴細胞轉化試驗結果為陽(yáng)性,表明受試樣品具有增強細胞免疫功能作用。
益生菌沖劑對受試動(dòng)物NK細胞活性的影響:由表6可知,中、高劑量組的NK細胞活性高于對照組,差異均有顯著(zhù)性意義,益生菌沖劑對受試動(dòng)物NK細胞活性試驗結果為陽(yáng)性,表明受試樣品具有增強NK細胞活性作用。
試驗結論 本文為研究復合乳酸菌粉((嗜酸乳桿菌+乳雙歧桿菌+低聚木糖)的益生菌沖劑在增強兒童免疫力方面的作用,采用了《保健食品檢驗與評價(jià)技術(shù)規范》(2003版)之“增強免疫力功能檢驗方法”,即對SPF級昆明種小鼠經(jīng)口每日分別給予該復合益生菌產(chǎn)品0.25、0.50、1.50 g/kg·BW,相當于人推薦日服量的5、10、30倍共4周,結果表明綿羊紅細胞誘導的小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應試驗和ConA誘導的小鼠脾淋巴細胞轉化增殖試驗結果呈陽(yáng)性,說(shuō)明該樣品具有增強細胞免疫功能作用(P<0.05);同時(shí)受試動(dòng)物NK細胞活性試驗結果呈陽(yáng)性,說(shuō)明該樣品具有顯著(zhù)增強NK細胞活性作用(P<0.01),以上結果表明攝入該復合益生菌粉沖劑產(chǎn)品具有增強免疫力的功能作用。
參考資料: 朱韶娟,張立彥.復合乳酸菌粉沖劑增強免疫力作用的研究[J].現代食品科技,2013,29(01):77-80+145. |