試驗設計 試驗材料:變異鏈球菌BNCC186308;蔗糖培養基;低聚木糖培養基:以低聚木糖代替蔗糖添加到培養基中,低聚木糖濃度為2%,其余成分同蔗糖培養基;低聚木糖-蔗糖培養基:在蔗糖培養基中添加低聚木糖,使低聚木糖濃度為2%。將上述3種培養基充分溶解后,調節培養基pH值至7.6,高壓蒸汽滅菌鍋121℃滅菌20 min。 變異鏈球菌培養和菌懸液的制備:在潔凈工作臺內,接種活化后的變異鏈球菌至蔗糖液體培養基內,在37℃厭氧培養罐中培養48 h,利用一次性接種環(huán)取少量菌液接種在含蔗糖瓊脂培養基上,在37℃厭氧培養罐中培養48 h,再挑取單個(gè)菌落至蔗糖液體培養基內,在 37℃厭氧培養罐中培養24 h,在分光光度計上測600 nm處的吸光度為1.3,此菌液即為本實(shí)驗所需的工作菌懸液。 變異鏈球菌在3種培養基內的生長(cháng)、產(chǎn)酸情況的比較:取上述3種類(lèi)型的液體培養基于試管中,每種類(lèi)型各10支試管,每支試管各移取5 mL液體培養基,每支試管接種0.1 mL 變異鏈球菌菌懸液,在37℃厭氧培養罐中培養24 h,用分光光度計測量OD(600)值,用pH計測量培養基的pH值。 表1為變異鏈球菌在蔗糖、低聚木糖-蔗糖、低聚木糖3 種液體培養基中培養24 h 后的OD(600)值,結果顯示低聚木糖培養基OD(600)值明顯低于其他兩種培養基,說(shuō)明低聚木糖對變異鏈球菌的生長(cháng)產(chǎn)生抑制作用,低聚木糖-蔗糖培養基的OD(600)值低于蔗糖培養基,說(shuō)明低聚木糖對蔗糖培養基中的變異鏈球菌的生長(cháng)也產(chǎn)生抑制作用。 表2為變異鏈球菌在蔗糖、低聚木糖-蔗糖、低聚木糖液體培養基中培養24 h后的pH值;pH值即酸度水平,細菌代謝過(guò)程中會(huì )產(chǎn)生酸性物質(zhì),pH值越低代表糖代謝越充分;結果顯示低聚木糖培養基pH值高于其他兩組,低聚木糖-蔗糖培養基pH值高于蔗糖培養基,說(shuō)明低聚木糖對變異鏈球菌的生長(cháng)代謝產(chǎn)生抑制作用,同時(shí)低聚木糖對蔗糖培養基中變異鏈球菌的生長(cháng)也產(chǎn)生抑制作用。 本文對3種培養基中變異鏈球菌的生長(cháng)和產(chǎn)酸情況進(jìn)行研究,通過(guò)模擬口腔環(huán)境厭氧培養24 h后,用分光光度計和pH計分別測定3種培養基中的OD(600)值和pH值,驗證低聚木糖對口腔變異鏈球菌的抗齲齒作用,結果表明低聚木糖能使變異鏈球菌的生長(cháng)和產(chǎn)酸受到明顯抑制,低聚木糖-蔗糖培養基也會(huì )使變異鏈球菌的生長(cháng)和產(chǎn)酸能力下降,因此低聚木糖可作為一種新型防齲齒添加劑。 參考資料: |