試驗方法

受試對象：

       40只雄性Wistar大鼠，體重為240-250 g。將大鼠分別飼養在環(huán)境控制室（25±2℃）中的不銹鋼絲底籠中，給予12 h的光照/黑暗循環(huán)條件。

方法：

       適應環(huán)境一周后，將大鼠分為5個(gè)處理組（每組8只）：1）對照組，2）DMH（陽(yáng)性對照組），3）XOS（10％）對照組，4）DMH+XOS（5％）組和5）DMH+XOS（10％）組。

       DMH組、DMH+XOS（5％）組和 DMH+XOS（10％）組的大鼠每周通過(guò)腹股溝區域的皮下注射接受3劑溶于鹽水（0.5 ml）的DMH，誘導結腸異常隱窩形成。DMH在第三次給藥后1周開(kāi)始飲食治療。XOS干預組飼喂含有XOS的日糧，而正常對照組和DMH對照組飼喂基礎日糧，持續45天。

       試驗期間大鼠可以自由獲取食物和水。每隔一周稱(chēng)重，每天記錄飼料攝入量。在實(shí)驗期結束時(shí)，用乙醚麻醉動(dòng)物并通過(guò)斷頭處死，立即切除肝臟和大腸。測定盲腸內菌群的變化，對異常隱窩病灶ACF進(jìn)行分析（異常隱窩的發(fā)展被用作結腸癌的生物標志物，本研究的療效終點(diǎn)是減少ACF/結腸和異常隱窩的多隱窩集群（＞2個(gè)隱窩/病灶）），以及對結腸和肝臟組織進(jìn)行生化分析。

試驗結果

1. XOS對體重、盲腸和肝臟重量的影響

       如表1所示，與正常對照組大鼠相比，DMH對照組的體重增加和盲腸重量明顯較低（P＜0.05），肝臟重量也有所下降。

       XOS的飲食干預顯著(zhù)改善了（P≤0.05）DMH組大鼠的體重和盲腸重量（DMH±5％XOS和DMH±10％XOS），肝臟重量也被飲食中的XOS所逆轉。

2. 結腸內容物中的微生物群

       如表2所示，與正常對照組大鼠相比，DMH的處理顯著(zhù)減少了雙歧桿菌的數量，增加了產(chǎn)氣莢膜梭菌和大腸桿菌的數量。

       與正常對照組和DMH對照組相比，飲食中添加X(jué)OS使雙歧桿菌數量顯著(zhù)增加（P≤0.05）。與DMH對照組相比，XOS的補充顯著(zhù)減少了產(chǎn)氣莢膜梭菌和大腸桿菌的數量（P≤0.05）。此外，膳食XOS還顯著(zhù)降低了盲腸的pH值（數據未顯示）。

3. 增殖標記：異常隱窩病灶（ACF）

       如表3所示，ACF僅存在于用DMH處理的大鼠結腸中。

       與DMH對照組相比，XOS的干預顯著(zhù)降低了ACF的尺寸（P＜0.05，以每個(gè)病灶的隱窩數衡量），對于1、2、3和4的隱窩/病灶，隱窩多樣性降低了約50％。還發(fā)現，在DMH＋10％XOS組中，ACF顯著(zhù)減少，3和4的隱窩未顯示隱窩多樣性。

4. 結腸粘膜和肝臟脂質(zhì)過(guò)氧化和抗氧化酶活性的變化

       如表4所示，與正常對照組大鼠相比，DMH處理的大鼠結腸黏膜中脂質(zhì)過(guò)氧化物減少，肝臟中的脂質(zhì)過(guò)氧化物增加，而且結腸粘膜和肝臟中谷胱甘肽-S-轉移酶（GST）和過(guò)氧化氫酶的活性顯著(zhù)降低。

       補充XOS后能改善脂質(zhì)過(guò)氧化水平，提高結腸粘膜和肝臟中谷胱甘肽-S-轉移酶和過(guò)氧化氫酶的活性，這可能有助于抑制結腸癌的發(fā)生。

試驗結論

 該研究表明，膳食XOS對DMH誘導的大鼠結腸癌模型有保護作用。XOS的干預顯著(zhù)增加了有益菌的數量，減少了ACF的數量。此外，飲食中的XOS減少了DMH誘導的結腸組織抗氧化的改變，這有助于發(fā)揮益生元XOS對結腸癌的預防潛力。