試驗設計 配制腦心浸液液體培養基和普通肉湯瓊脂培養基,將變異鏈球菌標準菌株(ATCC25175)置于腦心浸液液體培養基中進(jìn)行復蘇,在普通肉湯瓊脂培養基上進(jìn)行平板劃線(xiàn),確定變異鏈球菌為純培養;此后采用無(wú)菌棉簽刮取平板上適量菌落,與生理鹽水混合制備菌懸液,備用。將普通肉湯液體培養基分裝為5瓶低聚木糖組、5瓶蔗糖組,其中各組低聚木糖和蔗糖質(zhì)量濃度分別為1%、2%、8%、16%、20%,另設未加入低聚木糖和蔗糖(質(zhì)量濃度為0)的普通肉湯液體培養基為空白對照組;取蔗糖組和低聚木糖組各濃度培養基各200 μL,均加入菌懸液30 μL,混勻后分別注入蜂窩微孔板各孔中,于全自動(dòng)微生物生長(cháng)曲線(xiàn)分析儀37℃恒溫條件下培養24 h,每隔30 min檢測吸光度值(A值),計算培養前后A值的變化量(ΔA),每組測量3次取平均值;取蔗糖組和低聚木糖組各濃度培養基各50 mL,均加入菌懸液50 μL,混勻后于恒溫搖床中培養發(fā)酵(37℃,220 r/min),并在0、5.5、10、24 h取2.5 mL細菌發(fā)酵液于EP管中,檢測其pH值,計算細菌發(fā)酵前后pH值的變化量(ΔpH),每組測量3次取平均值。 試驗結果 (1)低聚木糖和蔗糖對變異鏈球菌生長(cháng)水平的影響 如圖1所示,變異鏈球菌培養24 h后,各質(zhì)量濃度低聚木糖組與空白對照組細菌培養基的ΔA比較發(fā)現,質(zhì)量濃度為1%和2%的低聚木糖組與空白對照組細菌培養基的ΔA比較,差異無(wú)統計學(xué)意義(P>0.05);質(zhì)量濃度為8%的低聚木糖組細菌培養基的ΔA大于空白對照組,而質(zhì)量濃度為16%和20%的低聚木糖組細菌培養基的ΔA明顯小于空白對照組,差異均有統計學(xué)意義(P<0.05)。 如圖1和圖2所示,變異鏈球菌培養24 h后,質(zhì)量濃度為1%和2%的低聚木糖組與蔗糖組細菌培養基的ΔA比較,差異無(wú)統計學(xué)意義(P>0.05);質(zhì)量濃度為8%的低聚木糖組細菌培養基的ΔA大于蔗糖組,而質(zhì)量濃度為16%和20%的低聚木糖組細菌培養基的ΔA明顯小于蔗糖組,差異均有統計學(xué)意義(P<0.05)。
(2)低聚木糖和蔗糖對變異鏈球菌產(chǎn)酸水平的影響 如圖3和圖4所示,質(zhì)量濃度為1%、2%的低聚木糖組細菌培養基ΔpH均高于空白對照組,質(zhì)量濃度為8%、16%、20%的低聚木糖組細菌培養基ΔpH略低于空白對照組,其差異均具有統計學(xué)意義(P<0.05);而各質(zhì)量濃度蔗糖組細菌培養基的ΔpH均低于空白對照組,差異有統計學(xué)意義(P<0.05);與同質(zhì)量濃度的蔗糖組比較,低聚木糖組細菌培養基的ΔpH均較高(P<0.05)。該研究結果顯示,隨著(zhù)細菌發(fā)酵時(shí)間的延長(cháng),低質(zhì)量濃度低聚木糖可能抑制了變異鏈球菌的產(chǎn)酸能力,且各時(shí)間點(diǎn)低聚木糖組細菌培養基的ΔpH均高于相同質(zhì)量濃度的蔗糖組,推測相較于蔗糖,低聚木糖可抑制變異鏈球菌產(chǎn)酸。
試驗結論 低濃度低聚木糖可抑制變異鏈球菌產(chǎn)酸,高濃度低聚木糖可抑制變異鏈球菌生長(cháng);相較于蔗糖,高濃度低聚木糖可降低變異鏈球菌的生長(cháng)及產(chǎn)酸水平,結合低聚木糖不被腸道吸收、可促進(jìn)腸道益生菌生長(cháng)、無(wú)熱量等優(yōu)點(diǎn),其可作為齲病易感人群、糖尿病人群、肥胖人群及兒童的食品甜味劑、牙膏甜味劑等。
參考資料: 林丹樂(lè ),謝永婷,王雪梅.低聚木糖對變異鏈球菌生長(cháng)和產(chǎn)酸影響的體外研究[J].中國實(shí)用口腔科雜志,2019,12(08):480-485. |