試驗設計 樣品:低聚木糖(XOS)以及XOS、菊粉、低聚果糖和部分水解瓜爾膠的混合物(MIX)。 飲食:HFD組、XOS組和MIX組均采用高脂飲食,其中60%的能量來(lái)自脂肪(豬油是主要的能量來(lái)源),而LFD組11%的能量來(lái)自脂肪(小麥淀粉是主要的能量來(lái)源)。XOS組的飲食含有8%(w/w)的XOS 95P,而MIX組的飲食含有2.7%的XOS95P、2.7%的Meritene、1.3%的Orafti P95和1.3%的Orafti GR。 實(shí)驗方法:雄性5周齡的C57BL/6J BomTac小鼠,在適應過(guò)程中喂食了8天的低脂飲食,適應后,小鼠被喂食含有纖維素作為纖維源的對照飲食(HFD或LFD)之一,或喂食纖維素被XOS或MIX替代的兩種實(shí)驗飲食之一,期間小鼠自由采食不同的日糧,并自由獲得飲用水,持續9周。體重和食物攝入量每周登記一次;在處死時(shí),小鼠禁食4小時(shí),然后在頸椎脫位后從靜脈中抽血,通過(guò)離心分離血樣制備血清,并在分析前儲存在-80℃。之后分析小鼠體脂含量和瘦體重、稱(chēng)重附睪脂肪組織和盲腸、測量血糖水平、檢測血漿中的胰島素、血清淀粉樣蛋白A;收集小鼠盲腸內容物用于SCFA分析、提取盲腸微生物群的DNA并對DNA濃度進(jìn)行測量。
試驗結果 (1)生理觀(guān)察 如圖1所示,從第二周到研究結束,LFD組的體重增長(cháng)顯著(zhù)低于HFD對照組;在研究的最后幾周,XOS組和HFD對照組之間出現了體重增加較低的趨勢,但僅在第8周有明顯差異(P<0.05)。 如表2所示,食物攝入量,以每天的能量攝入量計算,在LFD組明顯較低,但在喂食HFD的三個(gè)組之間沒(méi)有觀(guān)察到顯著(zhù)的差異;檢測脂肪組織的身體脂肪含量,顯示喂食LFD小鼠的脂肪含量顯著(zhù)較低,而所有喂養HFD的組在脂肪含量上是相等的。各組之間沒(méi)有觀(guān)察到瘦肉組織體質(zhì)量的差異。與HFD對照組相比,只有LFD的血糖和胰島素水平顯著(zhù)降低;切除盲腸,并對有盲腸內容物(總)和無(wú)盲腸內容物(組織)進(jìn)行稱(chēng)重,與HFD對照組相比,XOS和MIX都顯著(zhù)增加了盲腸總重和盲腸組織的總重量。 (2)盲腸中的SCFAs 如表3所示,HFD和LFD對照組的SCFAs總濃度和單個(gè)濃度非常相似,表明脂肪和淀粉的量對盲腸SCFAs的形成影響不大。對照組飲食的盲腸濃度也顯著(zhù)低于含有XOS和MIX的飲食,其中包括總SCFAs(HFD組平均48.6 μmol/g,XOS和MIX組分別為76.6μmol/g和67.8 μmol/g),乙酸(平均35. 5 μmol/g vs XOS的52.7 μmol/g和MIX的47.7 μmol/g),丙酸(平均5.3 μmol/g vs XOS的9.3和MIX的9.6 μmol/g)以及丁酸(平均5.0 μmol/g vs XOS的11.9 μmol/g和MIX的7.7 μmol/g);而喂食XOS組的丁酸濃度明顯(P<0.05)高于喂食MIX的組。SCFAs在對照組(LFD和HFD)的分布也非常相似,XOS組的丁酸比例高于喂食其他飲食的組,而喂食MIX組的丙酸比例更高。 (3)微生物群分析 如圖2A所示,在較高的分類(lèi)水平上,不同飲食組之間的分類(lèi)概況沒(méi)有強烈的視覺(jué)差異。如圖2B所示, XOS組中的大多數讀數映射到嗜熱雙歧桿菌,而其他處理中則以假長(cháng)雙歧桿菌為主(p<0.05)。 如圖3所示,視覺(jué)差異在科和屬的水平上是明顯的。與熱圖相關(guān)的系統發(fā)育分析也顯示了一個(gè)初步的證據,即相對于HFD和LFD對照,XOS和MIX處理的微生物組更為相似。幾個(gè)細菌屬在各種處理中都有明顯的不同(P≤0.05);最明顯的是喂食MIX和XOS的小鼠盲腸中的擬桿菌、雙歧桿菌、Dehalobacterium和副擬桿菌的增加。XOS組也顯示出毛螺菌科和螺桿菌水平的升高。與HFD相關(guān)的擬桿菌是mucispirillum屬、安德克氏菌屬、顫螺菌屬和理研菌屬,S24-7屬與LFD處理有很強的相關(guān)性。 如圖4所示,總SCFAs、丁酸和乙酸與XOS的處理密切相關(guān),而MIX則與丙酸關(guān)系更密切,主要的區別是MIX實(shí)際上與擬桿菌、雙歧桿菌、脫鹵桿菌和丙酸有更好的相關(guān)性,而XOS與丁酸、副擬桿菌和其他一些在上述分析中未發(fā)現的細菌有更強的關(guān)聯(lián)。MIX與HFD及其相關(guān)細菌高度負相關(guān),其中包括一些細菌科,包括疣微菌科、腸桿菌科和理研菌科;LFD處理缺乏強的共關(guān)聯(lián),并與XOS及其共關(guān)聯(lián)細菌呈負相關(guān)。
如圖5A所示,雙歧桿菌在MIX和XOS組的豐度顯著(zhù)高于HFD和LFD對照組;如圖5B所示,與LFD組相比,S24-7的豐度在HFD組中急劇下降,而MIX和XOS組的豐度則介于這兩個(gè)極端之間;如圖5C所示毛螺菌科的豐度在HFD組很低,在MIX組明顯較高,在XOS組更高。
試驗結論 本文研究了低聚木糖(XOS)以及XOS、菊粉、低聚果糖和部分水解瓜爾膠的混合物(MIX)對喂食高脂飲食(HFD)小鼠的影響,結果顯示XOS組的盲腸中乙酸、丙酸和丁酸的含量顯著(zhù)高于HFD組,且XOS組的丁酸含量高于MIX組;XOS組的盲腸微生物群比HFD組含有更多的雙歧桿菌、毛螺菌科和S24-7細菌;與XOS飲食相比,MIX飲食中的纖維多樣性并沒(méi)有提供任何優(yōu)勢;以上結果表明XOS是一種有前景的候選益生元。
參考資料: Karin Berger, Stephen Burleigh, Maria Lindahl, et al. Xylooligosaccharides Increase Bifidobacteria and Lachnospiraceae in Mice on a High-Fat Diet, with a Concomitant Increase in Short-Chain Fatty Acids, Especially Butyric Acid[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2021, 69(12):3617-3625. |