試驗部分 研究對象: 96只21日齡斷奶雄性ICR小鼠(20-22 g),在標準化的環(huán)境條件下(22±1℃,相對濕度為50%,12h的明暗循環(huán)中),將其放在單獨的不銹鋼籠中進(jìn)行7天的適應期。 方法: 將96只28日齡的小鼠隨機分成4個(gè)研究組,研究期間飼喂相同的商業(yè)谷物飼料,每組分別飲用含有0%(對照組)、1%、2%、4% XOS-95P的去離子水(即每200mL去離子水中添加0g、2.1g、4.2g、8.4g XOS-95P制成的飲用水)。在整個(gè)實(shí)驗期間所有小鼠都可以自由進(jìn)食食物和實(shí)驗飲用水,研究周期為30天,期間每天記錄實(shí)驗性飲用水,且每隔10天隨機選擇每組8只小鼠記錄一次體重和食物攝入量;此外,在38、48和58日齡時(shí),分別從每組中隨機選擇8只斷水斷食8h的小鼠,采用二氧化碳將小鼠安樂(lè )死后,對小鼠進(jìn)行盲腸酸堿度、盲腸壁重、血清鈣和磷濃度的檢測、骨骼特性分析、腸道形態(tài)學(xué)評價(jià)和免疫組織化學(xué)分析。 如表1所示,所有小鼠的平均增重或最終平均體重在各組之間沒(méi)有明顯差異(P>0.05)。此外,沒(méi)有觀(guān)察到食物和水的攝入量或有效攝入量的顯著(zhù)變化(p>0.05)。 如表2所示,觀(guān)察到各組小鼠盲腸pH具有顯著(zhù)差異性(p=0.005)且呈劑量依賴(lài)性降低;盲腸壁重量呈現劑量依賴(lài)性增加,但與對照組相比,只在4% XOS組中觀(guān)察到顯著(zhù)差異(p=0.01)。當分析血清鈣和磷濃度時(shí),所有組在第58天沒(méi)有發(fā)現顯著(zhù)差異(p> 0.05)。 如表3所示,在不同的生長(cháng)階段,各組間股骨中軸的長(cháng)度、重量或直徑?jīng)]有顯著(zhù)差異(p>0.05);盡管在所有XOS組中通過(guò)DEXA測定的整個(gè)股骨和股骨遠端的骨密度顯示出在三個(gè)生長(cháng)階段的劑量依賴(lài)性增加,但是在生長(cháng)后期0% XOS和4% XOS之間在股骨遠端的骨密度(BDM)中觀(guān)察到顯著(zhù)差異(p=0.04);同時(shí),在生長(cháng)后期4% XOS組的骨斷裂強度顯著(zhù)高于0% XOS組(p=0.008);第4組在第58天的960/cm FWHM值顯著(zhù)低于第1組(p=0.007),其他各組之間無(wú)顯著(zhù)差異(p>0.05)。 如表4所示,隨著(zhù)飲用XOS濃度的增加,十二指腸絨毛高度呈線(xiàn)性增加。然而,與0%、1%和2% XOS相比,只有4% XOS達到統計學(xué)顯著(zhù)性(分別p<0.001、p=0.001和p=0.008)。同時(shí),觀(guān)察到隱窩深度的劑量依賴(lài)性減少,僅在0% XOS組和4% XOS組之間觀(guān)察到顯著(zhù)增加(p=0.006)。VH:CD的變化與腸絨毛高度和隱窩深度一致。與0% XOS和1% XOS相比,使用4% XOS顯著(zhù)增加了VH:CD (分別p=0.001和p=0.004)。 進(jìn)行免疫組織化學(xué)分析和半定量分析,以評估TRPV6和NCX1在所有58天小鼠十二指腸中的蛋白表達。如圖1所示,所有組均觀(guān)察到NCX1陽(yáng)性染色。與不含XOS的對照組相比,1%、2%和4% XOS組均上調了NCX1的表達,但僅在對照組和4% XOS組之間觀(guān)察到顯著(zhù)增加(p= 0.01)。同時(shí),在1%,2%和4% XOS組小鼠中TRPV6的表達明顯高于對照組(分別為p= 0.02,p = 0.03和p = 0.04)。 圖1 低聚木糖(XOS)添加對四組十二指腸Na+/Ca2 +交換劑1 (NCX1) (a, b)和瞬時(shí)受體電位香草醛受體6 (TRPV6)(c, d)表達的影響。 比例尺:10 μm。數值為平均值(n=8),其標準誤差由豎線(xiàn)表示。 a, b不同字母的平均值差異顯著(zhù)(p<0.05;圖基(tukey)事后檢驗法)。 參考資料: |